УДК 619:579.842.1+619:616.98:579.843.1
Кирьянов Е.А. Кампилобактериоз животных: Лекция /Приморский с.-х. ин-т. - Уссурийск, 1992. - 23 с.
В лекции дано современное представление
о возбудителях кампилобактериозной инфекции, освещены эпизоотология, инфекционный
процесс у разных видов животных, диагностика, меры борьбы и профилактика.
Рассчитана на студентов, специалистов ветеринарной медицины, а также аспирантов
и соискателей.
Табл. 4. Библиогр. : 4 назв.
Рецензенты: Нивин Е.А., кандидат биологических наук, доцент;
Бурик В.В., кандидат ветеринарных наук, доцент.
Печатается по решению методического совета
Приморского сельскохозяйственного института.
© Приморский сельскохозяйственный
институт, 1992
План лекции
I. Определение болезни
2. Краткая история
3. Возбудителя кампилобактериозов
4, Эпизоотология
5, Патогенез
6. Кампилобактериоз отдельных видов животных
7. Диагностика кампилобактериоза
8. Меры борьбы и профилактика
9. Рекомендуемая литература
Кампилобактериоз
- инфекционное заболевание различных видов сельскохозяйственных животных, характеризующееся
у маточного поголовья рождением слабого молодняка, абортами, бесплодием, у молодняка
- энтеритами, высокой летальностью.
Кампилобактериоз наблюдается у людей, относится к профессиональным заболеваниям.
Краткая история. Информация о кампилобактериозе начинается
сообщением английских микробиологов Мак-Фадиана и Штокмана, обнаруживших в 1913
г. вибрион в плодах, в матке овец. В последующем возбудитель от овец был изолирован
в США (1924). Германии (1927), Испании (1956) и в других странах.
Возбудитель кампилобактериоза крупного рогатого скота открыт в 1918 г. Смитом.
Первые сведения о возбудителе кампилобактериоза у коров в стране принадлежат
В.А.Якимову (1926), позже - Е.В. Козловскому (1958). Большой вклад в изучение
данной проблемы внесли П.А.Трилевко, П.А. Волосков, Н.Н.Михайлов, М.А. Лучко,
А.В.Голиков и др.
Скотоводство Дальнего Востока в отношении кампилобактериоза не является исключением.
Патология имеет место на различных территориях региона, сопровождаясь значительным
экономическим ущербом.
Возбудители кампилобактериоза. Микроорганизмы относятся к семейству
Спирилл, роду Кампилобактер. К настоящему времени данный род объединяет 14 видов
патогенных и непатотогенных кампилобактеров (табл. 1).
Табл. 1. Виды кампилобактеров, выделенных от людей и животных.
Виды |
Источники
выделения |
Формы
патологии |
C. fetus
subsp.fetus |
Крупный рогатый
скот, овцы, свиньи, птица |
У жвачных
животных аборты, эндометриты |
C. hyointestinalis |
Овцы |
Аборты |
C. jejuni |
Различные
виды животных, птица, человек |
Энтериты |
C. coli |
Различные
виды животных, птица, человек |
Энтериты |
C. laridis |
Чайки, собаки,
человек |
Энтериты |
C. pyloridis |
Человек,
некоторые виды животных |
Возможно
участие в этиологии язвенной болезни |
C. cinaedi |
Различные
виды животных |
- |
C. fennelliae |
Различные
виды животных |
- |
C. fecalis |
Различные
виды животных |
- |
C. consisus |
Различные
виды животных |
- |
C. sputorium
subsp.sputorum |
Крупный рогатый
скот, овцы |
Непатогенный |
Кампилобактеры
- это грамотрицательные микроорганизмы, спор не образуют, полярно снабжены одним
или двумя жгутиками, обладают энергичным винтообразным движением. Форма их спиралевидная,
изогнутая. При соединении двух клеток образование напоминает - образную форму
или вид летящей чайки. Длина клеток - 0,5-8 мкм, ширина - 0,2-0,5 мкм. В старых
культурах возможно появление кокковидных клеток микроба.
Кампилобактеры относятся к микроаэрофилам. Для их инкубирования необходимо присутствие
СО2, температура 37,5°С. С целью получения культур возбудителя используют полужидкие
и твердые питательные среды. Термофильные кампилобактеры растут при температуре
37-43°С. Оптимальная температура 42-43°С. Желаемую репродукцию этих микробов
получают в газовой смеси, состоящей из 5% кислорода, 10% СО2 и 85%
азота.
Микроорганизмы, вызывающие кампилобактериоз, биохимически мало активны: выделяют
каталазу, редуцируют нитраты, слабо образуют сероводород, не растут в МПБ с
содержанием 3,5%.
Патогенность различных видов вибрионов различна. Кампилобактеры, вызывающие
патологию у крупного рогатого скота и овец, обладают антигенными особенностями
и вирулентностью. В патогенном отношении представляют интерес Термофильные вибрионы
группы Jejuni:C.jejuni, C.coli, C.laridis , которые вызывают кишечную патологию.
Названные микроорганизмы способны к инвазивности, продуцируют цитолитические
токсины.
Антигенная структура кампилобактеров изучена недостаточно. Однако результаты
исследований многих авторов свидетельствуют о наличии серовариантов микроба
в пределах вида. К настоящему времени идентифицировано 34 серотипа термофильных
вибрионов.
Экология. Отношение к факторам окружающей среды у различных
видов вибрионов неодинаково. Микроорганизмы, изолированные из тканей плодов
и матки овец, при - 20°С жизнеспособны в течение 5-8 мес. Они выдерживают также
температуру жидкого азота. Вибрионы быстро разрушаются при действии света, высушивания.
Имеются наблюдения о снижении репродукции кампилобактера йеюни при рН равной
2,3,
Оптимальные условия для размножения этого вида находятся в пределах рН 6,2-8,7.
Нагревание до 60°С быстро их инактивирует. Вибрионы весьма чувствительны к дезинфекторам,
содержащим кислый компонент и альдегид. Вибрионы вида фетус в воде, сене, навозе,
почве погибают при 6-20°С через 10-20 дней, в содержимом желудка, печени сохраняются
10-20 дней.
Своеобразно отношение кампилобактеров к антибиотикам. В опытах с вибрионом йеюни
показано, что метод дисков не всегда дает объективные результаты. Полагают,
что ответ зависит от иноколюма (посевная доза микроба). При увеличении количества
микроорганизмов в 100 раз МИК (величина минимальной ингибирующей концентрации)
фосфомицина возрастала в 2-5 раз, а при уменьшении количества микробных
тел в 100 раз снижалась в отношении c.jejuni в 16 раз. Равным образом отмечены
также негативные последствия действия температуры, продолжительности инкубации,
состава питательной среды. На основании многочисленных опытов, проведенных в
различных странах мира, установлены различные спектры чувствительности кампилобактеров
к лекарственным препаратам. В частности, высокой активностью в отношении кампилобактера
йеюни обладают амикацин, хлор феникол, тетрациклин, метронидазол, ниридазол,
эритромицин. В отношении кампилобактера коли активность проявляли нитрофурановые
препараты, диметридазол, гентамицин, амикацин. Аналогичное действие этих препаратов
было для кампилобактеров спуторум, гиосентестиналис. Сводка действия различных
препаратов на кампилобактеры показана в таблице 2. К сожалению, следует подчеркнуть,
что данные могут варьировать в ту или иную сторону, так как, в связи с широким
использованием перечисленных препаратов, увеличиваются возможности появления
резистентных форм вибрионов. Полагают, что устойчивость вибрионов к антибиотикам
связана с присутствием плазмидрезистентности в микробной клетке.
Эпизоотология.
Носителями кампилобактеров являются различные виды домашних и диких животных,
а также птица. Из организма млекопитающих выделение вибрионов в окружающую среду
происходит с молоком, истечениями из половых органов, спермой, абортированным
плодом, плацентой, фекалиями. Распространение возбудителя осуществляется через
корм, подстилку, волу, продукцию животноводства. Отмечено, что обильная контаминация
мясных туш наблюдается в случае надреза кишечника, когда содержимое попадает
на органы и
ткани убитого животного. Подчеркивается особенно значительная инфицированность
убойных кур, достигающая на отдельных птицекомбинатах 14,5-67,4%. Вывозимая
продукция для потребления с этих предприятий оказывается на 18,3-41,3% пораженной
кампилобактерами, В связи со столь значительной контаминацией мяса птицы утверждается
роль вибрионов как этиологического фактора профессионального заболевания у работников
птицеводства. На основе полученных результатов исследований подчеркивается важная
роль мяса и других продуктов животноводства в распространении кампилобактеров
в среде потребителей, особенно среди детского населения.
2. Чувствительность
кампилобактеров к различным препаратам (МИК90).
Препараты |
Кампилобактерии |
||||
C.
fetus |
C.
hyointestinalis |
C.
sputorum |
C.
jejuni |
C.
coli |
|
1. Амикацин |
- |
8 |
1 |
1,6 |
2 |
2. Ампициллин |
2 |
0,5 |
0,125 |
32 |
8 |
3. Гентамицин |
1 |
2 |
2 |
0,5 |
1 |
4. Канамицин |
- |
16 |
1 |
4 |
128 |
5. Клиндамицин |
1 |
- |
- |
0,5 |
0,5 |
6. Тетрамицин |
128 |
||||
7. Ципрофлоксацин |
1 |
- |
- |
0,25 |
0,25 |
8. Эритромицин |
2 |
8 |
0,125 |
2 |
128 |
9. Олеандомицин |
- |
16 |
2 |
- |
128 |
10. Фуразолидон |
- |
- |
- |
- |
0,25 |
Примечание: "-" - не действует, цифры - действует в концентрации мкг/мл.
Восприимчивость и механизм эпизоотического процесса среди видов животных имеет
особенности. В скотоводстве основным источником возбудителя служат быки-производители
и больные коровы. Инфекционный процесс, таким образом, можно наблюдать у быков,
половозрелых телок, коров, а также у телят. Заражение происходит половым путем
при спаривании особей, через сперму при искусственном осеменении, при контакте
инфицированных животных со здоровыми. В результате многочисленных исследований,
проведенных различными авторами, показано, что в неблагополучных стадах возбудитель
может передаваться от быка к быку, от коровы к корове, к телке, бычку при совместном
их содержании. При этом подмечено, что у молодняка интенсивность заражения возрастает
по мере полового созревания. Присутствие вибрионов обнаруживается в вагинальной
слизи, в смывах из препуция. У исследователей сложилось мнение о ведущей роли
быков в вибриозном эпизоотическом процессе. Осеменение спермой инфицированных
быков ведет к энзоотическому бесплодию стада коров. В отарах овец передача возбудителя,
в отличие от крупного рогатого скота, осуществляется алиментарным путем. Роль
баранов в трансформации вибриона через сперму остается недоказанной. Большая
роль в распространении патогена отводится овцематкам - бактерионосителям, выделяющими
микроб при окотах, абортах, с каловыми массами. В этом процессе значение имеют
также и бараны, которые выделяют патоген с фекалиями. Кроме крупного рогатого
скота и овец в эпизоотическом процессе участвуют свиньи, птица, дикие животные.
В последние годы обозначилась также проблема термофильных кампилобактеров, из
которых в патологии животных патогенная роль отводится c.jejuni. Обозначенный
вид возбудителя вызывает поражение органов пищеварения: кишечника, печени, аборты
у овец, свиней. Заболевание относят к зоонозам. При этом животные составляют
основной резерв инфекции, инфицированность свиней достигает 63%, в птицеводстве
- 100%. Активное носительство кампилобактера
отмечено у чаек (20-70%), ворон (90%), голубей (20-40%), гусей (10-6О%), грачей
(45-83%). Зараженные животные, птица создают риск для проявления инфекции у
людей. Поисковые исследования последнего времени свидетельствуют о широком вовлечении
в эпизоотический процесс норок. По данным Г.Г.Власовой, исследовавшей 1003 образца
материала от норок, установлена их значительная контаминация С. jejuni, составляющая
59%. Вибрион содержался в эмбриональной ткани (75,4%),в желчи (65,3%), в кишечнике
(40,2%), в фекалиях (53,4%). Результаты исследований позволяют утверждать, что
норки через фекалии способны интенсивно контаминировать вибрионом окружающую
среду, служить резервуаром микроба для синантропных птиц, грызунов, бродячих
животных. Норки, как и другие виды животных и птиц, представляют также эпидемиологическое
значение для развития инфекционного процесса у людей. Кампилобактериоз животных
и птиц не имеют сезонности. Клиническое проявление заболевания обуславливается
физиологическим состоянием животного (беременность), а также условиями кормления
и содержания.
Экономический ушерб при кампилобактериозе значителен. В скотоводстве
он складывается за счет абортов, перегулов у коров, снижения молочной продуктивности,
затрат на проведение противоэпизоотических мероприятий, в овцеводстве - за счет
абортов, бесплодия, падежа животных, затрат на мероприятия, в птицеводстве -
за счет снижения яйценоскости, снижения живой массы, падежа птицы и затрат на
мероприятия. Кроме этого животноводство несет убытки от заболеваемости и падежа
молодняка. Сложилось мнение, что кампилобактериоз - заболевание взрослого поголовья
животных, что инфекционный процесс
поражает только органы репродуктивной сферы. Представленная информация показывает,
что патология может распространяться на различные виды и возрастные группы животных.
Поэтому возникает необходимость в лабораторных обследованиях поголовья с целью
выявления животных - бактерионосителей и определения ареала эпизоотического
процесса.
В неблагополучных по кампилобактериозу пунктах показатели превалентности варьируют.
На станциях искусственного осеменения в эпизоотический процесс может вовлекаться
от 1 до 57% быков. При этом степень участия в этом процессе зависит от возраста
животных. Она обычно бывает выше у быков свыше четырехлетнего возраста и может
достигать 23,5%. В стадах коров у 53%, в стадах телок до 75% обнаруживают катарально
узелковые вагиниты. В популяциях коров, где кампилобактериоз устанавливается
впервые, абортирует 10-30-60% животных. После аборта от 5 до 30% коров перегуливает
по 8-10 раз. При этом повторные аборты у коров бывают редко. Последствия выкидыша
осложняются задержанием последа, эндометритом. Подавляющее число абортов наблюдается
в зимне-весеннее время, что связывается с условиями качества кормления и ухода.
Последствия кампилобактериоза тяжелым бременем отражаются на экономическом положении
хозяйства. Установлено, что в неблагополучных хозяйствах недополучают по 15-20
телят на 100 маток, каждая корова за период дней бесплодия снижает надой на
500 и более литров молока. По дaнным Г.Е.Гашкова (1969), обобщившим ущерб по
20 неблагополучным пунктам, оказалось, что хозяйства за 5 лет недополучили 14,2
тыс. телят, 4,6 тыс. тонн мяса и 5,5 т молока.
Экономический ущерб составил более 5,7 млн. руб.
Значительные убытки от заболевания исследователи наблюдали и в других отраслях
животноводства. На свинофермах, например, абортирует до 65-68,6% свиноматок
от числа опоросившихся. В отарах овец, по данным некоторых авторов, аборты овцематок
могут достигать 75%. При этом у значительной части овцематок отмечены осложнения
с летальным исходом, достигающим 28,2%. Не является исключением также птицеводство.
В этой отрасли в неблагополучных подразделениях падеж молодняка птицы в возрасте
до 1 месяца колеблется в пределах 2,7-15%, 20-17% цыплят-бройлеров снижают привес,
куры на 15-35% уменьшают яйцекладку. Приведенные немногочисленные примеры убедительно
свидетельствуют о значительном экономическом ущербе, который может случится
в результате заноса возбудителей кампилобактериоза в популяции восприимчивых
животных и птиц.
Патогенез. Механизм развитая инфекционного процесса при кампилобактериозе
неоднозначен. У маточного поголовья крупного рогатого скота заболевание начинается
с размножения возбудителя во влагалище и последующeго его передвижения в матку,
яйцеводы, в яичники. Процесс миграции протекает в течение 30 дней. Продукты
жизнедеятельности микроба вызывают воспалительный процесс в слизистой оболочке
родополовых путей, гибель эмбрионов и бесплодие до 6 мес. Острый процесс длится
3-4 мес. В последующем в
зависимости от резистентности организма животного и вирулентности возбудителя
последний может контаминировать материнскую плаценту, плодные оболочки, нарушить
плацентарное кровообращение. В отдельных случаях вибрионы могут оказаться также
в желудке, печени, в тканях мозга плода и вызвать его гибель. В неблагополучных
стадах до 30% коров донашивают плод, но телята рождаются слабыми, погибают в
первые дни их жизни.
При кампилобактериозе овец инфекционный процесс также наблюдается в органах
размножения. Более чувствительными оказываются молодые суягные матки. После
алиментарного заражения через три дня вибрионы обнаруживаются в крови, затем
проникают в матку, плаценту, плод. В плодовместилище развивается воспалительно-некротический
процесс, финалом которого является аборт. Характерно при этом, что аборт происходит
во второй половине суягности. Воспалительный процесс нередко отягощается септическими
явлениями, приводящими к летальному исходу 3-10% овцематок. У переболевших овцематок
остается бактерионосительство продолжительностью до 25 мес, у ягнят - до 18
мес.
У свиней при вибриозной инфекции также нарушаются нормальные условия плодоношения,
в результате которых происходит аборт. Аборты обычно происходят в конце супоросности.
Если опорос в нормальные сроки, то среди поросят наблюдаются мертвые особи,
да и живые поросята нежизнеспособны. Инфекционный процесс у свиней протекает
по типу сальмонеллеза,поэтому нерезко остается недиагностированным. У птиц основные
изменения локализуются в печени и кишечнике. В этих органах отмечается картина
гепатита и энтерита.
Сходно протекает кампилобактериоз у норок. Интоксикация сопровождается воспалительными
процессами в матке, кишечнике. Самки абортируют или приносят мертвых или нежизнеспособных
щенят.
Кампилобактериоз отдельных видов животных
Крупный рогатый скот. Патология характеризуется комплексным
поражением органов размножения, в процесс вовлекаются слизистые оболочки влагалища,
матки, яйцеводов и яичники. Плодоношение нередко на 4-7 мес. стельности прерывается
абортом. Динамика развития воспалительного процесса продолжается 4-5 мес. В
этот период на ранней стадии развития возможна гибель плода, которая просматривается
и о ней можно говорить по течке, наступающей в отдаленные сроки.
Информация о возрасте абортированных плодов представляется различной. По учтенным
данным они могут быть обнаружены на 38, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240 дни
после зачатия Максимальное количество абортов однако происходит в первый месяц,
а затем с 5 по 8 мес. стельности. Течение инфекционного процесса после аборта
сопровождается удлинением фазы полового покоя. Нарушается ритм полового цикла.
На зачатие требуется от 3 до 6 и более осеменений. Отдельные коровы перегуливают
4-6 мес.
У инфицированных коров и телок развивается катаральный, катарально-узелковый
вагинит. После аборта заметна острая гиперемия слизистой оболочки влагалища,
кровянисто-слизистые выделения. Вибриозный выкидыш, как правило, сопровождается
задержанием последа, эндометритом.
Абортированные плоды, плацента не имеют характерных признаков. У плодов до трех
месячного возраста наблюдают гиперемию, кровоизлияния, отечность. Такие же показатели
остаются и в последующем, но локализуются в ограниченных участках. Для плодов
старших возрастов свойственно накопление жидкости в полостях организма.
У быков, больных кампилобактериозом отмечают гиперемию слизистой оболочки препуция
и полового члена, обильное выделение слизи в течение 2-3 дней после заражения.
В дальнейшем перечисленные признаки исчезают, процесс протекает бессимптомно
в виде бактерионосительства.
Овцы. У овец показателем на кампилобактериоз является аборт,
мертворождаемость. Наступлению аборта предшествует угнетение, снижение или прекращение
позыва к приему корма. В последующем становится заметным беспокойство, отечность
срамных губ. После аборта повышается температура тела до 41,2-41,4°С. Изгнание
плода нередко сопровождается задержкой последа, выделениями коричневатой жидкости.
Инкубационный период при экспериментальном заражении длится 7-25 дней. Аборты
происходят в разные сроки суягности, что зависит от времени алиментарного заражения.
Абортированные плоды обычно содержат повышенное количество жидкости в грудной
и брюшной полостях, в желудке - коричневатая слизь с примесью крови, паренхиматозные
органы с кровоизлияниями.
Свиньи. Кампилобактериоз свиней мало изученное заболевание.
Проявление инфекции также сопровождается абортами, мертворождаемостью. При этом
в отдельных популяциях свиней аборты могут достигать 65,8-68,6% к числу опоросившихся
свиноматок. Полагают, что инфицирование свиней гложет происходить через сперму
хряка, алиментарно. Видимо в эпизоотическом процессе определенную роль играют
крысы, выделенные кампилобактеры от которых имели сходство с возбудителем, изолированным
от больных свиноматок. Аборты наступают без предшественников в последний месяц
супоросности. После аборта у свиноматок развивается катаральный вагинит.
Птицы. Кампилобактериоз сопровождается гибелью цыплят, снижением
привеса живой массы у бройлеров и яйценоскости кур. Возбудителем болезни является
кампилобактер йеюни.
У больных птиц, кроме общих симптомов, диагностируются признаки гепатоэнтерита.
На вскрытии трупов обнаруживают катаральное воспаление слизистой оболочки кишечника,
некротические фокусы в печени, истощение.
Норки. В эпизоотический процесс вовлекаются также норки. Болезнь
проявляется абортами, мертворождением.
У щенят норок поражаются органы пищеварения, значительная часть щенят гибнет.
Диагностика кампилобактериоза. Диагноз как и при других инфекционных
заболеваниях животных, устанавливают на основании клинических, эпизоотологических,
патологоанатомических и лабораторных методов исследования. При клинико-эпизоотологическом
анализе обращают внимание на аборты, наступающие в разные сроки беременности,
рождение слабого, нежизнеспособного молодняка, мертворождаемость, бесплодие.
Основное значение в постановке диагноза на кампилобактериоз принадлежит лабораторным
анализам. Объектами лабораторного исследования при кампилобактериозе крупного
рогатого скота могут являться: у быков - сперма, препуциальная слизь, смывы;
у коров - выделения из половых органов, плод, плацента, молоко, лимфатические
узлы тазовой полости, фекалии, желчь; у телят - кровь в период диареи, а также
фекалии, желчь, желудок, кишечник; у овец - беременная матка, плод, желчь, фекалии,
лимфатические узлы
кишечника; у свиней - плод, желчь, органы пищеварения, фекалии; у птиц - печень,
слепые отростки кишечника. В отдельных случаях инфицирование животных и птиц
может происходить при употреблении воды при фекальном ее загрязнении. Поэтому
возникает необходимость в представлении проб воды. При наличии показаний на
кампилобактериоз в лабораторию направляют сыворотку крови животных. Материал
для лабораторного исследования направляете в свежем виде, лучше в термосе на
льду. Следует при этом учитывать, что c.jejuni плoxo сохраняется в процессе
транспортировки. В связи с этим рекомендуется посевы образцов
фекалий делать непосредственно в хозяйстве или материал помешать в среду сохранения.
Роль такой среды выполняет тиогликолевый бульон (рН 8,5) или щелочная пептонная
вода, содержащая 0,05% тиогликолата натрия и 0,025% цистеина. Материал с консервантом
необходимо держать при 4°С.
Доставленный в лабораторию патологический материал подвергается различным методам
исследования. Процесс обработки образца начинается с приема и регистрации. Затем
исследования выполняются по определенному плану, включающему микроскопию нативных
мазков, бактериологическое и биохимическое исследования, постановку биопробы,
серологические исследования и идентификацию возбудителя.
Микроскопическое исследование. Готовят мазки, которые после
фиксации, окрашивают по Граму или фуксином Циля в течение 1-2 мин. Раствор фуксина
предварительно 1:5 разбавляют дистиллированной водой. В окрашенных препаратах
в положительных случаях обнаруживают грамотрицательные микробные клетки, имеющие
форму удлиненных спирилл, мелких кокков, летящих чаек, запятой. При окраске
по методу Романовского-Гамзы в терминальных участках микробной клетки выявляется
зернистость. Мазки можно исследовать с помощью метода иммунофлуоресценции (РИФ).
Культуры возбудителя, кроме этого, исследуют в висячей или раздавленной капле
на подвижность.
Бактериологическое исследование. Локализация кампилобактеров
в органах и тканях организма животных имеет различия. Существуют также некоторые
особенности изоляции возбудителя из объектов, подлежащих исследованию. Из абортированных
плодов для посева на питательную среду берут содержимое желудка в объеме 0,5
мл. Кроме этого, в том же объеме взвеси, взятой из легких, печени, селезенки,
амниотической жидкости, головного мозга, делают посев в пробирки. Для получения
культуры возбудителя фетус венералис или фетус интестиналис используют полужидкий
0,15-0,2%-ный мясо-печеночный пептонный агар (ПЖА), сафранино-железо-новобиоциновую
среду (СЖН), 2-3%-ный мясо-печеночный пептонный агар (ЖПА), среду Китта-Тароцци,
агар Мартена и др. При этом в питательные среды добавляют 5-10% дифибринированной
крови крупного рогатого скота, овец, кроликов или сыворотку крови лошади, аминопептид-2
(5-10%), экстракт сухих дрожжей (5 г на 1 л среды), тиогликолят натрия (0,5
на 1 л среды).
При получении культур микроба из спермы, слизи, исходный материал предварительно
подвергают центрифугированию или фильтрации. Посевы делают на ПЖА или СЖН, лучше
в работе использовать одновременно обе среды. Пробирки или чашки Петри с посевами
помечают в эксикатор или микроанаэростат,
культивируют в присутствии 10-15% углекислого газа при температуре 37°С в течение
6-10 дн. Осмотр пробирок и чашек Петри с исследуемым материалом проводится через
каждые три дня.
Рост культуры на ПЖА отмечается над поверхностью среды в виде серовато-голубоватого
диска толщиной 1-4 мм. На плотной среде появляются мелкоросинчатые колонии,
видимые через лупу. На СЕН рост кампилобактеров не сопровождается изменением
цвета среды (розовый). В присутствии развития посторонней микрофлоры среда приобретает
ярко-желтую окраску. В этих случаях проводят очистку культуры от посторонней
микрофлоры. Процедуру выполняют различными методами: а) заражают беременных
свинок, которые абортируют. Из абортированных плодов делают посевы. Если аборт
не наступает, то их через 10-12 дн. убивают, из эмбрионов и полости матки делают
посевы; б) производят рассев загрязненной культуры в чашки Петри с последующим
отсевом характерных колоний в пробирки на ПЖА; в) культуры вносят в пастеровские
пипетки под слой ПЖА; г) смешанные культуры пропускают через мембранные фильтры.
Более сложным делом является изоляция термофильных кампилобактеров: C.jejuni,
C.coli, C.laridis.
Для их выделения пригоден ПЖА с добавлением 7% аминопептида-2 и 0,05% тиогликолата
натрия. Пробирки, чашки Петри помешают в эксикатор или в микроанаэростат, воздушный
микробассейн которых наполняется газовой смесью, состоящей из 5% кислорода,
10% углекислого газа и 85% азота. Культивирование ведется в термостате при температуре
43°С. Кампилобактеры этих видов, в отличие от микробов группы фетус, имеют длину
от I до 3 мкм, толщину - 0,5-1 мкм. Микробные клетки имеют вид точильного камня
- они более широкие в средине и сужены в концах. На твердых питательных средах
патоген образует более мелкие колонии (0,1-0,3 мл), блестящие, без - форм. Отличительной
особенностью этих кампилобактеров является и то, что они не растут при температуре
25°С, гидролизуют натриевую соль гипуровой кис лоты.
Биохимическая активность различных видов кампилобактеров слабо
выражена. Вместе с тем, некоторые показатели этой активности используют для
дифференциации возбудителей рода Кампилобактер (табл. 3).
Табл. 3. Идентификация кампилобактеров по биохимическим свойствам(по Берги,1980)
Каталаза |
Воссановление
нитрата |
Н2 |
1%
глицина |
3,5%
глицина |
Рост
при 25°С |
|
C. fetus subsp. fetus | + |
- |
- |
- |
- |
+ |
C. fetus subsp. hyointestinalis | + |
- |
+ |
+ |
- |
+ |
C. jejuni | + |
- |
+ |
+ |
- |
- |
C. sputorium | - |
+ |
+ |
+ |
- |
+ |
C. bubulus | - |
+ |
+ |
+ |
+ |
-/+ |
C. fecalis | + |
? |
+ |
+ |
-/+ |
- |
Биологическое
исследование. Для биопробы используют беременных морских свинок, куриные
эмбрионы, белых мышей, кроликов, при необходимости стельных телок, суягных овец.
Морских свинок инфицируют внутрибрюшинно или во влагалище. В положительных случаях
морские свинки абортируют. Если в течение 10-12 дн. аборта не будет, то их убивают.
Абортированные плоды и содержимое полости матки исследуют бактериологически.
Беременным крупным животным культуру возбудителя вводят подкожно или через рот.
Животные абортируют или их убивают. Материал также подвергают бактериологическому
исследованию. У опытных кроликов через 2-3 дн. патология проявляется диареей.
Куриные эмбрионы заражают на хорионалантоисную оболочку в дозе 25 млн.м.кл.
Гибель эмбрионов происходит на 3-7 сутки. Отход их достигает 30-60%.
Серологические исследования. Серологическую диагностику проводят
путем постановки РА, РСК (РДСК) и методом флуоресцирующих антител. У крупного
рогатого скота обычно РА ставят с влагалищной слизью (РАВС), у овец - с сывороткой
крови.
Для постановки РА необходимы: агглютинирующие моноспецифические сыворотки, нормальная
сыворотка, исследуемая суспензия (антиген), заводской антиген. Типирование культур
вначале проводят ориентировочно по капельной РА, затем окончательно в пробирочной
РА.
Достоверность исследования слизи от коров на кампилобактериоз зависит от состояния
половых органов. Необходимо материал брать в период полового покоя животного.
Важно, чтобы в этот период отсутствовали патологические выделения из влагалища.
Слизь забирается на стерильный тампон, который помешают в пробирку, и в те же
сутки доставляют в лабораторию. В лаборатории, данный тампон переносят в другую
пробирку, содержащую 5 мл стерильного формалинизированного - 3%-ного раствора
поваренной соли, и выдерживают 12-14 ч при температуре 1-4°С. После этого, тампоны
отжимают пинцетом, жидкость центрифугируют 30 мин. при 2,5-3 тыс.об/мин.
Для РА используют надосадочную жидкость в разведении: 1:50, 1:100, 1:200, 1:400.
За положительную реакцию принимают четкую агглютинацию во всех четырех или в
первых двух разведениях. При сомнительном результате - агглютинация выражена
слабо и только в первых двух пробирках. При исследовании сыворотки крови овец
РА ставят в трех разведениях - 1:100, 1:200, 1:400. Реакцию считают положительной
при наличии выраженной агглютинации в разведении 1:200 и 1:400 на 3-4 креста.
РА оценивают отрицательной, когда нет агглютинации или она наблюдается в титре
1:100 на 1-2 креста.
В последние годы для диагностики c.jejuni разработана технология приготовления
антигена, приготовлены ги-
периммунные адсорбированные кроличьи ОН - сыворотки. Предложена также реакция
коагглютинации.
Убедительной для подтверждения диагноза на кампилобактериоз является реакция
длительного связывания комплемента (ГДСК). Для ее постановки требуется: исследуемая
нормальная сыворотка крови, антиген, комплемент, гелюли зин, эритроциты барана,
физиологический раствор. Реакцию оценивают по задержке гемолиза, выраженному
в крестах.
РДСК дает показатель через 2-4 недели после заражения телят. При исследовании
слизи от этих же животных положительная РА обнаруживается лишь через 3-4 месяца
после их заражения. Поэтому для определения ареала эпизоотического процесса
целесообразно в начале животных исследовать в РДСК.
Срок исследования: серологического - 4 дн., бактериологического - 10 дн.
Кампилобактериоз у крупного рогатого скота следует дифференцировать от бруцеллеза,
трихомоноза; у овец - от
бруцеллеза, сальмонеллеза, хламидиоза; у свиней - от бруцеллеза, сальмонеллеза,
хламидиоза; у норок - от сальмонеллеза.
Лечение. Для лечения больных быков применяют пеницеллин и стрептомицин
по I мл ЕД, антибиотики эмульгируют в 50-60 мл растительного масла или рыбьего
жира. Препараты вводят в препуциальннй мешок после его обработки антисептическими
растворами. Одновременно с этим указанные антибиотики в дозе по 4 тыс. ЕД на
кг массы животного на 0,5% растворе новокаина 2 раза в сутки инъецируют внутримышечно.
После четырехдневного лечения делают перерыв за 5-6 дней. Затем курс терапии
повторяют: дважды в сутки внутримышечно вводят окситетрациклин по 5 тыс. ЕД/кг
массы животного. Препуций обрабатывают 5%-ной эмульсией фуразолидона. Через
месяц после лечебных процедур сперму быка трижды с интервалом в 10 дней подвергают
бактериологическому исследованию на кампилобактериоз. При отрицательных результатах
исследования быков признают здоровыми.
Коров лечат также пенициллином и стрептомицином. Антибиотики по 1 млн ЕД вводят
в полость матки в течение 4 дней. Кроме этого инъекцируют внутримышечно стрептомицин
по 4 тыс. ЕД на кг массы в сутки. Влагалище орошают раствором фурациллина или
риванола. Важным обстоятельством обеспечивающим эффективность лечения, является
определение чувствительности кампилобактеров к препаратам. Из приведенных выше
данных в этих це лях с наилучшим успехом могут быть использованы ампициллин,
стрептомицин, канамицин, левомицетин, мицерин, мономицин, окситетрациклин, пентриксил,
теллуристокислый калий, тетрациклин, тиомерсал, фуразолидон, хлортетрациклин,
дигидрострептомицин с ампициллином, окситетрациклин с олеандомицином или с фуразолидоном.
Иммунитет. Стойкий иммунитет после переболевания наблюдается
у овец. Такие овцы повторно заболевают весьма редко. У крупного рогатого скота,
перенёсшего заболевание, иммунитет менее стойкий. Информативные данные относительно
иммунитета у этого вида животных, по данным исследователей, противоречивы. Если
при кампилобактериозе овец сложилось твердое убеждение, касающееся напряженного
и продолжительного иммунитета после спонтанного заражения, что нельзя сказать
о патологии у крупного рогатого скота.
Меры борьбы и профилактика. Основным источником возбудителя
кампилобактериоза служат быки-производители. Поэтому в стратегии противоэпизоотических
мероприятий значение отводится постоянному контролю за состоянием здоровья их
в отношении данной патологии. Принимаются меры по недопущению таких быков для
воспроизводства стада в хозяйствах и на предприятиях племживобъединения. Комплектование
предприятий скотоводства должно осуществляться животными, происходивший из благополучных
ферм по кампилобактериозу, после профилактического их карантина и лабораторного
обследования.
В случае установления диагноза на кампилобактериоз зараженные быки-производители
подлежат изоляции. Вопрос о их использовании в воспроизводстве должен решаться
с учетом ценности данных животных. Ценные особи подлежат лечению под лабораторным
контролем. Их использование может быть решено после надежного убеждения, основанного
на наличии многократных бактериологических исследований при отрицательных результатах.
В комплексе общих профилактических мер является нежелательным использование
быков- производителей в вольной случке.
В программе профилактических мероприятий следует также отводить внимание контролю
за состоянием здоровья маточного поголовья в отношении инфекционных и инвазионных
заболеваний органов воспроизведения. Нужно помнить и о том, что кампилобактеры
могут распространяться не только через контаминированную сперму, но и при контакте
больных животных со здоровыми. Необходимо учитывать также период кампилоносительства
у коров. Видимо возможность самовыздоровления коров, если их не осеменять в
течение трех месяцев, нельзя признать состоятельной. Такие животные должны подлежать
изоляции и лечению до полного освобождения от кампилобактеров из организма животных.
Важным мероприятием является ликвидация бесконтрольного использования быков
в стадах маточного поголовья.
В неблагополучных пунктах по вибриозу овец вводятся ограничительные мероприятия.
Больное поголовье животных подлежит изоляции в отдельные группы. Абортированные
плоды, последы собирают в специальную тару, дезинфицируют. Животных подвергают
лечению. В неблагополучных пунктах проводят иммунизацию.
При кампилобактериозе среди других видов животных также необходимо выполнять
систему ограничительных мероприятий, животных обрабатывать антибиотиками тетрациклинового
ряда.
В системе противокампилобактериозных мероприятий особое значение приобретает
устранение путей распространения вибрионов. Животные являются основным резервуаром
кампилобактеров. Аналогичное положение занимает дикая и домашняя птица. Это
обуславливает необходимость обеспечения условий, ограничивающих или полностью
исключающих контакт синантропной птицы с животноводческими фермами, выгулами.
На фермах, предприятиях, перерабатывающих сырье жи вотного происхождения, в
блоках общественного питания должны в полном объеме выдерживаться требования
техноло гии, особенно требования санитарной культуры при переработке сырья животного
происхождения. Показано, что трансформация возбудителя происходит различными
путями: через молоко, полученное от коров с заболеванием мастит, через мясо,
контаминированное возбудителем в период разделки туш животных, в период приготовления
мясных, колбасных полуфабрикатов и т.д. Немаловажное значение в комплексе мероприятий
отводится осуществлению дератизации, дезинсекции и дезинфекции на животноводческих
объектах, на перерабатывающих предприятиях, а также на предприятиях общественного
питания. Отходы пищевых предприятий используются в корм животным, в случае контаминации
их кампилобактерами они могут стать одним из факторов в распространении и заражении
животных.
Кампилобактериоз относится к зооантропонозам. Заболевание людей в связи с этим
может быть обусловлено контактом при содержаний и уходе за сельскохозяйственными
животными, птицей, в собачьих питомниках, а также при работе в качестве персонала
на убойных площадках, мясокомбинатах, молокозаводах. Заражение возможно в домашних
условиях в результате контакта с собакой, кошкой, имеющих признаки диареи, а
также при содержании декоративных птиц. Большой риск заражения людей существует
при употреблении воды из озер, рек, ручьев. Если они подвергаются загрязнению
сбросами с животноводческих ферм, комплексов, предприятий перерабатывающих сырье
животного происхождения. В этом отношении могут представлять эпизоотологическую
и эпидемиологическую опасность площадки, навесы для летне-лагерного содержания
животных, обычно размещаемые по берегам водных источников.
ЛИТЕРАТУРА
I. Бюллетень Всесоюзного института
экспериментальной ветеринарии. - М. - 1984. - Вып. 56.
2. Голиков А.В. Вибриоз животных и птицы. - М., 1978.- 110 с.
3. Триленко П.А. Вибриоз крупного рогатого скота и овец. - М.: Сельхозиздат,
1961, - 240 с.
4. Чайка Н.А., Хазенсон Л.Б., Бутцлер Ж.П. Кампилобактериоз. - М.: Медицина,
1988. - 350 с.
СОДЕРЖАНИЕ
Краткая история ...................................... 3
Возбудители кампилобактериоза........................ 3
Эпизоотология........................................ 4
Патогенез............................................ 10
Кампилобактериоз отдельных видов ..................... II
Диагностика кампилобактериоза........................ 13
Лечение и иммунитет.................................. 19
Меры борьбы и профилактика ........................... 2С
Литература........................................... 22
Кирьянов Едисей Автомонович
КАМПИЛОБАКТЕРИОЗ ЖИВОТНЫХ
Подписано в печать 14. 04. 1992г.
Формат 60x90 1/16. Бумага писчая. Печать офсетная.
Уч. изд. л. 1,5. Тираж 200 экз.
Приморский сельскохозяйственный
институт.
692500. Уссурийск, пр. Блюхера, 44.
Участок оперативной полиграфии
Приморского с.-х. ин-та.
692500. Уссурийск, ул. Раздольная, 8.
Эта лекция воспроизводится по оригинальному изданию 1992 года. Ссылка на этот сайт (vetfac.narod.ru), и на автора лекции (Кирьянов Едисей Автомонович) обязательна.
Если вы не нашли здесь того, что искали, вы можете заказать реферат или контрольную работу на этом сайте. Все работы выполняются опытным преподавателем микробиологии и не копируются с сайтов рефератов. Все подробности можно узнать, пройдя по этой ссылке.