На главную страницу

УДК 619:579.842.1+619:616.98:579.843.1

Кирьянов Е.А. Кампилобактериоз животных: Лекция /Приморский с.-х. ин-т. - Уссурийск, 1992. - 23 с.

В лекции дано современное представление о возбудителях кампилобактериозной инфекции, освещены эпизоотология, инфекционный процесс у разных видов животных, диагностика, меры борьбы и профилактика.
Рассчитана на студентов, специалистов ветеринарной медицины, а также аспирантов и соискателей.
Табл. 4. Библиогр. : 4 назв.


Рецензенты: Нивин Е.А., кандидат биологических наук, доцент;
Бурик В.В., кандидат ветеринарных наук, доцент.


Печатается по решению методического совета
Приморского сельскохозяйственного института.

© Приморский сельскохозяйственный институт, 1992
План лекции
I. Определение болезни
2. Краткая история
3. Возбудителя кампилобактериозов
4, Эпизоотология
5, Патогенез
6. Кампилобактериоз отдельных видов животных
7. Диагностика кампилобактериоза
8. Меры борьбы и профилактика
9. Рекомендуемая литература

Кампилобактериоз - инфекционное заболевание различных видов сельскохозяйственных животных, характеризующееся у маточного поголовья рождением слабого молодняка, абортами, бесплодием, у молодняка - энтеритами, высокой летальностью.
Кампилобактериоз наблюдается у людей, относится к профессиональным заболеваниям.


Краткая история. Информация о кампилобактериозе начинается сообщением английских микробиологов Мак-Фадиана и Штокмана, обнаруживших в 1913 г. вибрион в плодах, в матке овец. В последующем возбудитель от овец был изолирован в США (1924). Германии (1927), Испании (1956) и в других странах.
Возбудитель кампилобактериоза крупного рогатого скота открыт в 1918 г. Смитом.
Первые сведения о возбудителе кампилобактериоза у коров в стране принадлежат В.А.Якимову (1926), позже - Е.В. Козловскому (1958). Большой вклад в изучение данной проблемы внесли П.А.Трилевко, П.А. Волосков, Н.Н.Михайлов, М.А. Лучко, А.В.Голиков и др.
Скотоводство Дальнего Востока в отношении кампилобактериоза не является исключением. Патология имеет место на различных территориях региона, сопровождаясь значительным экономическим ущербом.


Возбудители кампилобактериоза. Микроорганизмы относятся к семейству Спирилл, роду Кампилобактер. К настоящему времени данный род объединяет 14 видов патогенных и непатотогенных кампилобактеров (табл. 1).

Табл. 1. Виды кампилобактеров, выделенных от людей и животных.

Виды
Источники выделения
Формы патологии
C. fetus subsp.fetus
Крупный рогатый скот, овцы, свиньи, птица
У жвачных животных аборты, эндометриты
C. hyointestinalis
Овцы
Аборты
C. jejuni
Различные виды животных, птица, человек
Энтериты
C. coli
Различные виды животных, птица, человек
Энтериты
C. laridis
Чайки, собаки, человек
Энтериты
C. pyloridis
Человек, некоторые виды животных
Возможно участие в этиологии язвенной болезни
C. cinaedi
Различные виды животных
-
C. fennelliae
Различные виды животных
-
C. fecalis
Различные виды животных
-
C. consisus
Различные виды животных
-
C. sputorium subsp.sputorum
Крупный рогатый скот, овцы
Непатогенный

Кампилобактеры - это грамотрицательные микроорганизмы, спор не образуют, полярно снабжены одним или двумя жгутиками, обладают энергичным винтообразным движением. Форма их спиралевидная, изогнутая. При соединении двух клеток образование напоминает - образную форму или вид летящей чайки. Длина клеток - 0,5-8 мкм, ширина - 0,2-0,5 мкм. В старых культурах возможно появление кокковидных клеток микроба.
Кампилобактеры относятся к микроаэрофилам. Для их инкубирования необходимо присутствие СО2, температура 37,5°С. С целью получения культур возбудителя используют полужидкие и твердые питательные среды. Термофильные кампилобактеры растут при температуре 37-43°С. Оптимальная температура 42-43°С. Желаемую репродукцию этих микробов получают в газовой смеси, состоящей из 5% кислорода, 10% СО2 и 85%
азота.
Микроорганизмы, вызывающие кампилобактериоз, биохимически мало активны: выделяют каталазу, редуцируют нитраты, слабо образуют сероводород, не растут в МПБ с содержанием 3,5%.
Патогенность различных видов вибрионов различна. Кампилобактеры, вызывающие патологию у крупного рогатого скота и овец, обладают антигенными особенностями и вирулентностью. В патогенном отношении представляют интерес Термофильные вибрионы группы Jejuni:C.jejuni, C.coli, C.laridis , которые вызывают кишечную патологию. Названные микроорганизмы способны к инвазивности, продуцируют цитолитические токсины.
Антигенная структура кампилобактеров изучена недостаточно. Однако результаты исследований многих авторов свидетельствуют о наличии серовариантов микроба в пределах вида. К настоящему времени идентифицировано 34 серотипа термофильных вибрионов.
Экология. Отношение к факторам окружающей среды у различных видов вибрионов неодинаково. Микроорганизмы, изолированные из тканей плодов и матки овец, при - 20°С жизнеспособны в течение 5-8 мес. Они выдерживают также температуру жидкого азота. Вибрионы быстро разрушаются при действии света, высушивания. Имеются наблюдения о снижении репродукции кампилобактера йеюни при рН равной 2,3,
Оптимальные условия для размножения этого вида находятся в пределах рН 6,2-8,7. Нагревание до 60°С быстро их инактивирует. Вибрионы весьма чувствительны к дезинфекторам, содержащим кислый компонент и альдегид. Вибрионы вида фетус в воде, сене, навозе, почве погибают при 6-20°С через 10-20 дней, в содержимом желудка, печени сохраняются 10-20 дней.
Своеобразно отношение кампилобактеров к антибиотикам. В опытах с вибрионом йеюни показано, что метод дисков не всегда дает объективные результаты. Полагают, что ответ зависит от иноколюма (посевная доза микроба). При увеличении количества микроорганизмов в 100 раз МИК (величина минимальной ингибирующей концентрации) фосфомицина возрастала в 2-5 раз, а при уменьшении количества микробных
тел в 100 раз снижалась в отношении c.jejuni в 16 раз. Равным образом отмечены также негативные последствия действия температуры, продолжительности инкубации, состава питательной среды. На основании многочисленных опытов, проведенных в различных странах мира, установлены различные спектры чувствительности кампилобактеров к лекарственным препаратам. В частности, высокой активностью в отношении кампилобактера йеюни обладают амикацин, хлор феникол, тетрациклин, метронидазол, ниридазол, эритромицин. В отношении кампилобактера коли активность проявляли нитрофурановые препараты, диметридазол, гентамицин, амикацин. Аналогичное действие этих препаратов было для кампилобактеров спуторум, гиосентестиналис. Сводка действия различных препаратов на кампилобактеры показана в таблице 2. К сожалению, следует подчеркнуть, что данные могут варьировать в ту или иную сторону, так как, в связи с широким использованием перечисленных препаратов, увеличиваются возможности появления резистентных форм вибрионов. Полагают, что устойчивость вибрионов к антибиотикам связана с присутствием плазмидрезистентности в микробной клетке.

Эпизоотология. Носителями кампилобактеров являются различные виды домашних и диких животных, а также птица. Из организма млекопитающих выделение вибрионов в окружающую среду происходит с молоком, истечениями из половых органов, спермой, абортированным плодом, плацентой, фекалиями. Распространение возбудителя осуществляется через корм, подстилку, волу, продукцию животноводства. Отмечено, что обильная контаминация мясных туш наблюдается в случае надреза кишечника, когда содержимое попадает на органы и
ткани убитого животного. Подчеркивается особенно значительная инфицированность убойных кур, достигающая на отдельных птицекомбинатах 14,5-67,4%. Вывозимая продукция для потребления с этих предприятий оказывается на 18,3-41,3% пораженной кампилобактерами, В связи со столь значительной контаминацией мяса птицы утверждается роль вибрионов как этиологического фактора профессионального заболевания у работников птицеводства. На основе полученных результатов исследований подчеркивается важная роль мяса и других продуктов животноводства в распространении кампилобактеров в среде потребителей, особенно среди детского населения.

2. Чувствительность кампилобактеров к различным препаратам (МИК90).

Препараты
Кампилобактерии
C. fetus
C. hyointestinalis
C. sputorum
C. jejuni
C. coli
1. Амикацин
-
8
1
1,6
2
2. Ампициллин
2
0,5
0,125
32
8
3. Гентамицин
1
2
2
0,5
1
4. Канамицин
-
16
1
4
128
5. Клиндамицин
1
-
-
0,5
0,5
6. Тетрамицин
128
7. Ципрофлоксацин
1
-
-
0,25
0,25
8. Эритромицин
2
8
0,125
2
128
9. Олеандомицин
-
16
2
-
128
10. Фуразолидон
-
-
-
-
0,25


Примечание: "-" - не действует, цифры - действует в концентрации мкг/мл.


Восприимчивость и механизм эпизоотического процесса среди видов животных имеет особенности. В скотоводстве основным источником возбудителя служат быки-производители и больные коровы. Инфекционный процесс, таким образом, можно наблюдать у быков, половозрелых телок, коров, а также у телят. Заражение происходит половым путем при спаривании особей, через сперму при искусственном осеменении, при контакте инфицированных животных со здоровыми. В результате многочисленных исследований, проведенных различными авторами, показано, что в неблагополучных стадах возбудитель может передаваться от быка к быку, от коровы к корове, к телке, бычку при совместном их содержании. При этом подмечено, что у молодняка интенсивность заражения возрастает по мере полового созревания. Присутствие вибрионов обнаруживается в вагинальной слизи, в смывах из препуция. У исследователей сложилось мнение о ведущей роли быков в вибриозном эпизоотическом процессе. Осеменение спермой инфицированных быков ведет к энзоотическому бесплодию стада коров. В отарах овец передача возбудителя, в отличие от крупного рогатого скота, осуществляется алиментарным путем. Роль баранов в трансформации вибриона через сперму остается недоказанной. Большая роль в распространении патогена отводится овцематкам - бактерионосителям, выделяющими микроб при окотах, абортах, с каловыми массами. В этом процессе значение имеют также и бараны, которые выделяют патоген с фекалиями. Кроме крупного рогатого скота и овец в эпизоотическом процессе участвуют свиньи, птица, дикие животные. В последние годы обозначилась также проблема термофильных кампилобактеров, из которых в патологии животных патогенная роль отводится c.jejuni. Обозначенный вид возбудителя вызывает поражение органов пищеварения: кишечника, печени, аборты у овец, свиней. Заболевание относят к зоонозам. При этом животные составляют основной резерв инфекции, инфицированность свиней достигает 63%, в птицеводстве - 100%. Активное носительство кампилобактера
отмечено у чаек (20-70%), ворон (90%), голубей (20-40%), гусей (10-6О%), грачей (45-83%). Зараженные животные, птица создают риск для проявления инфекции у людей. Поисковые исследования последнего времени свидетельствуют о широком вовлечении в эпизоотический процесс норок. По данным Г.Г.Власовой, исследовавшей 1003 образца материала от норок, установлена их значительная контаминация С. jejuni, составляющая 59%. Вибрион содержался в эмбриональной ткани (75,4%),в желчи (65,3%), в кишечнике (40,2%), в фекалиях (53,4%). Результаты исследований позволяют утверждать, что норки через фекалии способны интенсивно контаминировать вибрионом окружающую среду, служить резервуаром микроба для синантропных птиц, грызунов, бродячих животных. Норки, как и другие виды животных и птиц, представляют также эпидемиологическое значение для развития инфекционного процесса у людей. Кампилобактериоз животных и птиц не имеют сезонности. Клиническое проявление заболевания обуславливается физиологическим состоянием животного (беременность), а также условиями кормления и содержания.
Экономический ушерб при кампилобактериозе значителен. В скотоводстве он складывается за счет абортов, перегулов у коров, снижения молочной продуктивности, затрат на проведение противоэпизоотических мероприятий, в овцеводстве - за счет абортов, бесплодия, падежа животных, затрат на мероприятия, в птицеводстве - за счет снижения яйценоскости, снижения живой массы, падежа птицы и затрат на мероприятия. Кроме этого животноводство несет убытки от заболеваемости и падежа молодняка. Сложилось мнение, что кампилобактериоз - заболевание взрослого поголовья животных, что инфекционный процесс
поражает только органы репродуктивной сферы. Представленная информация показывает, что патология может распространяться на различные виды и возрастные группы животных. Поэтому возникает необходимость в лабораторных обследованиях поголовья с целью выявления животных - бактерионосителей и определения ареала эпизоотического процесса.
В неблагополучных по кампилобактериозу пунктах показатели превалентности варьируют. На станциях искусственного осеменения в эпизоотический процесс может вовлекаться от 1 до 57% быков. При этом степень участия в этом процессе зависит от возраста животных. Она обычно бывает выше у быков свыше четырехлетнего возраста и может достигать 23,5%. В стадах коров у 53%, в стадах телок до 75% обнаруживают катарально узелковые вагиниты. В популяциях коров, где кампилобактериоз устанавливается впервые, абортирует 10-30-60% животных. После аборта от 5 до 30% коров перегуливает по 8-10 раз. При этом повторные аборты у коров бывают редко. Последствия выкидыша осложняются задержанием последа, эндометритом. Подавляющее число абортов наблюдается в зимне-весеннее время, что связывается с условиями качества кормления и ухода.
Последствия кампилобактериоза тяжелым бременем отражаются на экономическом положении хозяйства. Установлено, что в неблагополучных хозяйствах недополучают по 15-20 телят на 100 маток, каждая корова за период дней бесплодия снижает надой на 500 и более литров молока. По дaнным Г.Е.Гашкова (1969), обобщившим ущерб по 20 неблагополучным пунктам, оказалось, что хозяйства за 5 лет недополучили 14,2 тыс. телят, 4,6 тыс. тонн мяса и 5,5 т молока.
Экономический ущерб составил более 5,7 млн. руб.
Значительные убытки от заболевания исследователи наблюдали и в других отраслях животноводства. На свинофермах, например, абортирует до 65-68,6% свиноматок от числа опоросившихся. В отарах овец, по данным некоторых авторов, аборты овцематок могут достигать 75%. При этом у значительной части овцематок отмечены осложнения с летальным исходом, достигающим 28,2%. Не является исключением также птицеводство. В этой отрасли в неблагополучных подразделениях падеж молодняка птицы в возрасте до 1 месяца колеблется в пределах 2,7-15%, 20-17% цыплят-бройлеров снижают привес, куры на 15-35% уменьшают яйцекладку. Приведенные немногочисленные примеры убедительно свидетельствуют о значительном экономическом ущербе, который может случится в результате заноса возбудителей кампилобактериоза в популяции восприимчивых животных и птиц.
Патогенез. Механизм развитая инфекционного процесса при кампилобактериозе неоднозначен. У маточного поголовья крупного рогатого скота заболевание начинается с размножения возбудителя во влагалище и последующeго его передвижения в матку, яйцеводы, в яичники. Процесс миграции протекает в течение 30 дней. Продукты жизнедеятельности микроба вызывают воспалительный процесс в слизистой оболочке родополовых путей, гибель эмбрионов и бесплодие до 6 мес. Острый процесс длится 3-4 мес. В последующем в
зависимости от резистентности организма животного и вирулентности возбудителя последний может контаминировать материнскую плаценту, плодные оболочки, нарушить плацентарное кровообращение. В отдельных случаях вибрионы могут оказаться также в желудке, печени, в тканях мозга плода и вызвать его гибель. В неблагополучных стадах до 30% коров донашивают плод, но телята рождаются слабыми, погибают в первые дни их жизни.
При кампилобактериозе овец инфекционный процесс также наблюдается в органах размножения. Более чувствительными оказываются молодые суягные матки. После алиментарного заражения через три дня вибрионы обнаруживаются в крови, затем проникают в матку, плаценту, плод. В плодовместилище развивается воспалительно-некротический процесс, финалом которого является аборт. Характерно при этом, что аборт происходит во второй половине суягности. Воспалительный процесс нередко отягощается септическими явлениями, приводящими к летальному исходу 3-10% овцематок. У переболевших овцематок остается бактерионосительство продолжительностью до 25 мес, у ягнят - до 18 мес.
У свиней при вибриозной инфекции также нарушаются нормальные условия плодоношения, в результате которых происходит аборт. Аборты обычно происходят в конце супоросности. Если опорос в нормальные сроки, то среди поросят наблюдаются мертвые особи, да и живые поросята нежизнеспособны. Инфекционный процесс у свиней протекает по типу сальмонеллеза,поэтому нерезко остается недиагностированным. У птиц основные изменения локализуются в печени и кишечнике. В этих органах отмечается картина гепатита и энтерита.
Сходно протекает кампилобактериоз у норок. Интоксикация сопровождается воспалительными процессами в матке, кишечнике. Самки абортируют или приносят мертвых или нежизнеспособных щенят.
Кампилобактериоз отдельных видов животных
Крупный рогатый скот. Патология характеризуется комплексным поражением органов размножения, в процесс вовлекаются слизистые оболочки влагалища, матки, яйцеводов и яичники. Плодоношение нередко на 4-7 мес. стельности прерывается абортом. Динамика развития воспалительного процесса продолжается 4-5 мес. В этот период на ранней стадии развития возможна гибель плода, которая просматривается и о ней можно говорить по течке, наступающей в отдаленные сроки.
Информация о возрасте абортированных плодов представляется различной. По учтенным данным они могут быть обнаружены на 38, 60, 90, 120, 150, 180, 210, 240 дни после зачатия Максимальное количество абортов однако происходит в первый месяц, а затем с 5 по 8 мес. стельности. Течение инфекционного процесса после аборта сопровождается удлинением фазы полового покоя. Нарушается ритм полового цикла. На зачатие требуется от 3 до 6 и более осеменений. Отдельные коровы перегуливают 4-6 мес.
У инфицированных коров и телок развивается катаральный, катарально-узелковый вагинит. После аборта заметна острая гиперемия слизистой оболочки влагалища, кровянисто-слизистые выделения. Вибриозный выкидыш, как правило, сопровождается задержанием последа, эндометритом.
Абортированные плоды, плацента не имеют характерных признаков. У плодов до трех месячного возраста наблюдают гиперемию, кровоизлияния, отечность. Такие же показатели остаются и в последующем, но локализуются в ограниченных участках. Для плодов старших возрастов свойственно накопление жидкости в полостях организма.
У быков, больных кампилобактериозом отмечают гиперемию слизистой оболочки препуция и полового члена, обильное выделение слизи в течение 2-3 дней после заражения. В дальнейшем перечисленные признаки исчезают, процесс протекает бессимптомно в виде бактерионосительства.
Овцы. У овец показателем на кампилобактериоз является аборт, мертворождаемость. Наступлению аборта предшествует угнетение, снижение или прекращение позыва к приему корма. В последующем становится заметным беспокойство, отечность срамных губ. После аборта повышается температура тела до 41,2-41,4°С. Изгнание плода нередко сопровождается задержкой последа, выделениями коричневатой жидкости. Инкубационный период при экспериментальном заражении длится 7-25 дней. Аборты происходят в разные сроки суягности, что зависит от времени алиментарного заражения. Абортированные плоды обычно содержат повышенное количество жидкости в грудной и брюшной полостях, в желудке - коричневатая слизь с примесью крови, паренхиматозные органы с кровоизлияниями.
Свиньи. Кампилобактериоз свиней мало изученное заболевание. Проявление инфекции также сопровождается абортами, мертворождаемостью. При этом в отдельных популяциях свиней аборты могут достигать 65,8-68,6% к числу опоросившихся свиноматок. Полагают, что инфицирование свиней гложет происходить через сперму хряка, алиментарно. Видимо в эпизоотическом процессе определенную роль играют крысы, выделенные кампилобактеры от которых имели сходство с возбудителем, изолированным от больных свиноматок. Аборты наступают без предшественников в последний месяц супоросности. После аборта у свиноматок развивается катаральный вагинит.
Птицы. Кампилобактериоз сопровождается гибелью цыплят, снижением привеса живой массы у бройлеров и яйценоскости кур. Возбудителем болезни является кампилобактер йеюни.
У больных птиц, кроме общих симптомов, диагностируются признаки гепатоэнтерита. На вскрытии трупов обнаруживают катаральное воспаление слизистой оболочки кишечника, некротические фокусы в печени, истощение.
Норки. В эпизоотический процесс вовлекаются также норки. Болезнь проявляется абортами, мертворождением.
У щенят норок поражаются органы пищеварения, значительная часть щенят гибнет.
Диагностика кампилобактериоза. Диагноз как и при других инфекционных заболеваниях животных, устанавливают на основании клинических, эпизоотологических, патологоанатомических и лабораторных методов исследования. При клинико-эпизоотологическом анализе обращают внимание на аборты, наступающие в разные сроки беременности, рождение слабого, нежизнеспособного молодняка, мертворождаемость, бесплодие.
Основное значение в постановке диагноза на кампилобактериоз принадлежит лабораторным анализам. Объектами лабораторного исследования при кампилобактериозе крупного рогатого скота могут являться: у быков - сперма, препуциальная слизь, смывы; у коров - выделения из половых органов, плод, плацента, молоко, лимфатические узлы тазовой полости, фекалии, желчь; у телят - кровь в период диареи, а также фекалии, желчь, желудок, кишечник; у овец - беременная матка, плод, желчь, фекалии, лимфатические узлы
кишечника; у свиней - плод, желчь, органы пищеварения, фекалии; у птиц - печень, слепые отростки кишечника. В отдельных случаях инфицирование животных и птиц может происходить при употреблении воды при фекальном ее загрязнении. Поэтому возникает необходимость в представлении проб воды. При наличии показаний на кампилобактериоз в лабораторию направляют сыворотку крови животных. Материал для лабораторного исследования направляете в свежем виде, лучше в термосе на льду. Следует при этом учитывать, что c.jejuni плoxo сохраняется в процессе транспортировки. В связи с этим рекомендуется посевы образцов
фекалий делать непосредственно в хозяйстве или материал помешать в среду сохранения. Роль такой среды выполняет тиогликолевый бульон (рН 8,5) или щелочная пептонная вода, содержащая 0,05% тиогликолата натрия и 0,025% цистеина. Материал с консервантом необходимо держать при 4°С.
Доставленный в лабораторию патологический материал подвергается различным методам исследования. Процесс обработки образца начинается с приема и регистрации. Затем исследования выполняются по определенному плану, включающему микроскопию нативных мазков, бактериологическое и биохимическое исследования, постановку биопробы, серологические исследования и идентификацию возбудителя.
Микроскопическое исследование. Готовят мазки, которые после фиксации, окрашивают по Граму или фуксином Циля в течение 1-2 мин. Раствор фуксина предварительно 1:5 разбавляют дистиллированной водой. В окрашенных препаратах в положительных случаях обнаруживают грамотрицательные микробные клетки, имеющие форму удлиненных спирилл, мелких кокков, летящих чаек, запятой. При окраске по методу Романовского-Гамзы в терминальных участках микробной клетки выявляется зернистость. Мазки можно исследовать с помощью метода иммунофлуоресценции (РИФ).
Культуры возбудителя, кроме этого, исследуют в висячей или раздавленной капле на подвижность.
Бактериологическое исследование. Локализация кампилобактеров в органах и тканях организма животных имеет различия. Существуют также некоторые особенности изоляции возбудителя из объектов, подлежащих исследованию. Из абортированных плодов для посева на питательную среду берут содержимое желудка в объеме 0,5 мл. Кроме этого, в том же объеме взвеси, взятой из легких, печени, селезенки, амниотической жидкости, головного мозга, делают посев в пробирки. Для получения культуры возбудителя фетус венералис или фетус интестиналис используют полужидкий 0,15-0,2%-ный мясо-печеночный пептонный агар (ПЖА), сафранино-железо-новобиоциновую среду (СЖН), 2-3%-ный мясо-печеночный пептонный агар (ЖПА), среду Китта-Тароцци, агар Мартена и др. При этом в питательные среды добавляют 5-10% дифибринированной крови крупного рогатого скота, овец, кроликов или сыворотку крови лошади, аминопептид-2 (5-10%), экстракт сухих дрожжей (5 г на 1 л среды), тиогликолят натрия (0,5 на 1 л среды).
При получении культур микроба из спермы, слизи, исходный материал предварительно подвергают центрифугированию или фильтрации. Посевы делают на ПЖА или СЖН, лучше в работе использовать одновременно обе среды. Пробирки или чашки Петри с посевами помечают в эксикатор или микроанаэростат,
культивируют в присутствии 10-15% углекислого газа при температуре 37°С в течение 6-10 дн. Осмотр пробирок и чашек Петри с исследуемым материалом проводится через каждые три дня.
Рост культуры на ПЖА отмечается над поверхностью среды в виде серовато-голубоватого диска толщиной 1-4 мм. На плотной среде появляются мелкоросинчатые колонии, видимые через лупу. На СЕН рост кампилобактеров не сопровождается изменением цвета среды (розовый). В присутствии развития посторонней микрофлоры среда приобретает ярко-желтую окраску. В этих случаях проводят очистку культуры от посторонней микрофлоры. Процедуру выполняют различными методами: а) заражают беременных свинок, которые абортируют. Из абортированных плодов делают посевы. Если аборт не наступает, то их через 10-12 дн. убивают, из эмбрионов и полости матки делают посевы; б) производят рассев загрязненной культуры в чашки Петри с последующим отсевом характерных колоний в пробирки на ПЖА; в) культуры вносят в пастеровские пипетки под слой ПЖА; г) смешанные культуры пропускают через мембранные фильтры.
Более сложным делом является изоляция термофильных кампилобактеров: C.jejuni, C.coli, C.laridis.
Для их выделения пригоден ПЖА с добавлением 7% аминопептида-2 и 0,05% тиогликолата натрия. Пробирки, чашки Петри помешают в эксикатор или в микроанаэростат, воздушный микробассейн которых наполняется газовой смесью, состоящей из 5% кислорода, 10% углекислого газа и 85% азота. Культивирование ведется в термостате при температуре 43°С. Кампилобактеры этих видов, в отличие от микробов группы фетус, имеют длину от I до 3 мкм, толщину - 0,5-1 мкм. Микробные клетки имеют вид точильного камня - они более широкие в средине и сужены в концах. На твердых питательных средах патоген образует более мелкие колонии (0,1-0,3 мл), блестящие, без - форм. Отличительной особенностью этих кампилобактеров является и то, что они не растут при температуре 25°С, гидролизуют натриевую соль гипуровой кис лоты.
Биохимическая активность различных видов кампилобактеров слабо выражена. Вместе с тем, некоторые показатели этой активности используют для дифференциации возбудителей рода Кампилобактер (табл. 3).

Табл. 3. Идентификация кампилобактеров по биохимическим свойствам(по Берги,1980)

 
Каталаза
Воссановление нитрата
Н2
1% глицина
3,5% глицина
Рост при 25°С
C. fetus subsp. fetus
+
-
-
-
-
+
C. fetus subsp. hyointestinalis
+
-
+
+
-
+
C. jejuni
+
-
+
+
-
-
C. sputorium
-
+
+
+
-
+
C. bubulus
-
+
+
+
+
-/+
C. fecalis
+
?
+
+
-/+
-

Биологическое исследование. Для биопробы используют беременных морских свинок, куриные эмбрионы, белых мышей, кроликов, при необходимости стельных телок, суягных овец.
Морских свинок инфицируют внутрибрюшинно или во влагалище. В положительных случаях морские свинки абортируют. Если в течение 10-12 дн. аборта не будет, то их убивают. Абортированные плоды и содержимое полости матки исследуют бактериологически. Беременным крупным животным культуру возбудителя вводят подкожно или через рот. Животные абортируют или их убивают. Материал также подвергают бактериологическому исследованию. У опытных кроликов через 2-3 дн. патология проявляется диареей. Куриные эмбрионы заражают на хорионалантоисную оболочку в дозе 25 млн.м.кл. Гибель эмбрионов происходит на 3-7 сутки. Отход их достигает 30-60%.
Серологические исследования. Серологическую диагностику проводят путем постановки РА, РСК (РДСК) и методом флуоресцирующих антител. У крупного рогатого скота обычно РА ставят с влагалищной слизью (РАВС), у овец - с сывороткой крови.
Для постановки РА необходимы: агглютинирующие моноспецифические сыворотки, нормальная сыворотка, исследуемая суспензия (антиген), заводской антиген. Типирование культур вначале проводят ориентировочно по капельной РА, затем окончательно в пробирочной РА.
Достоверность исследования слизи от коров на кампилобактериоз зависит от состояния половых органов. Необходимо материал брать в период полового покоя животного. Важно, чтобы в этот период отсутствовали патологические выделения из влагалища. Слизь забирается на стерильный тампон, который помешают в пробирку, и в те же сутки доставляют в лабораторию. В лаборатории, данный тампон переносят в другую
пробирку, содержащую 5 мл стерильного формалинизированного - 3%-ного раствора поваренной соли, и выдерживают 12-14 ч при температуре 1-4°С. После этого, тампоны отжимают пинцетом, жидкость центрифугируют 30 мин. при 2,5-3 тыс.об/мин.
Для РА используют надосадочную жидкость в разведении: 1:50, 1:100, 1:200, 1:400. За положительную реакцию принимают четкую агглютинацию во всех четырех или в первых двух разведениях. При сомнительном результате - агглютинация выражена слабо и только в первых двух пробирках. При исследовании сыворотки крови овец РА ставят в трех разведениях - 1:100, 1:200, 1:400. Реакцию считают положительной при наличии выраженной агглютинации в разведении 1:200 и 1:400 на 3-4 креста. РА оценивают отрицательной, когда нет агглютинации или она наблюдается в титре 1:100 на 1-2 креста.
В последние годы для диагностики c.jejuni разработана технология приготовления антигена, приготовлены ги-
периммунные адсорбированные кроличьи ОН - сыворотки. Предложена также реакция коагглютинации.
Убедительной для подтверждения диагноза на кампилобактериоз является реакция длительного связывания комплемента (ГДСК). Для ее постановки требуется: исследуемая нормальная сыворотка крови, антиген, комплемент, гелюли зин, эритроциты барана, физиологический раствор. Реакцию оценивают по задержке гемолиза, выраженному в крестах.
РДСК дает показатель через 2-4 недели после заражения телят. При исследовании слизи от этих же животных положительная РА обнаруживается лишь через 3-4 месяца после их заражения. Поэтому для определения ареала эпизоотического процесса целесообразно в начале животных исследовать в РДСК.
Срок исследования: серологического - 4 дн., бактериологического - 10 дн.
Кампилобактериоз у крупного рогатого скота следует дифференцировать от бруцеллеза, трихомоноза; у овец - от
бруцеллеза, сальмонеллеза, хламидиоза; у свиней - от бруцеллеза, сальмонеллеза, хламидиоза; у норок - от сальмонеллеза.
Лечение. Для лечения больных быков применяют пеницеллин и стрептомицин по I мл ЕД, антибиотики эмульгируют в 50-60 мл растительного масла или рыбьего жира. Препараты вводят в препуциальннй мешок после его обработки антисептическими растворами. Одновременно с этим указанные антибиотики в дозе по 4 тыс. ЕД на кг массы животного на 0,5% растворе новокаина 2 раза в сутки инъецируют внутримышечно. После четырехдневного лечения делают перерыв за 5-6 дней. Затем курс терапии повторяют: дважды в сутки внутримышечно вводят окситетрациклин по 5 тыс. ЕД/кг массы животного. Препуций обрабатывают 5%-ной эмульсией фуразолидона. Через месяц после лечебных процедур сперму быка трижды с интервалом в 10 дней подвергают бактериологическому исследованию на кампилобактериоз. При отрицательных результатах исследования быков признают здоровыми.
Коров лечат также пенициллином и стрептомицином. Антибиотики по 1 млн ЕД вводят в полость матки в течение 4 дней. Кроме этого инъекцируют внутримышечно стрептомицин по 4 тыс. ЕД на кг массы в сутки. Влагалище орошают раствором фурациллина или риванола. Важным обстоятельством обеспечивающим эффективность лечения, является определение чувствительности кампилобактеров к препаратам. Из приведенных выше данных в этих це лях с наилучшим успехом могут быть использованы ампициллин, стрептомицин, канамицин, левомицетин, мицерин, мономицин, окситетрациклин, пентриксил, теллуристокислый калий, тетрациклин, тиомерсал, фуразолидон, хлортетрациклин, дигидрострептомицин с ампициллином, окситетрациклин с олеандомицином или с фуразолидоном.
Иммунитет. Стойкий иммунитет после переболевания наблюдается у овец. Такие овцы повторно заболевают весьма редко. У крупного рогатого скота, перенёсшего заболевание, иммунитет менее стойкий. Информативные данные относительно иммунитета у этого вида животных, по данным исследователей, противоречивы. Если при кампилобактериозе овец сложилось твердое убеждение, касающееся напряженного и продолжительного иммунитета после спонтанного заражения, что нельзя сказать о патологии у крупного рогатого скота.
Меры борьбы и профилактика. Основным источником возбудителя кампилобактериоза служат быки-производители. Поэтому в стратегии противоэпизоотических мероприятий значение отводится постоянному контролю за состоянием здоровья их в отношении данной патологии. Принимаются меры по недопущению таких быков для воспроизводства стада в хозяйствах и на предприятиях племживобъединения. Комплектование
предприятий скотоводства должно осуществляться животными, происходивший из благополучных ферм по кампилобактериозу, после профилактического их карантина и лабораторного обследования.
В случае установления диагноза на кампилобактериоз зараженные быки-производители подлежат изоляции. Вопрос о их использовании в воспроизводстве должен решаться с учетом ценности данных животных. Ценные особи подлежат лечению под лабораторным контролем. Их использование может быть решено после надежного убеждения, основанного на наличии многократных бактериологических исследований при отрицательных результатах. В комплексе общих профилактических мер является нежелательным использование быков- производителей в вольной случке.
В программе профилактических мероприятий следует также отводить внимание контролю за состоянием здоровья маточного поголовья в отношении инфекционных и инвазионных заболеваний органов воспроизведения. Нужно помнить и о том, что кампилобактеры могут распространяться не только через контаминированную сперму, но и при контакте больных животных со здоровыми. Необходимо учитывать также период кампилоносительства у коров. Видимо возможность самовыздоровления коров, если их не осеменять в течение трех месяцев, нельзя признать состоятельной. Такие животные должны подлежать изоляции и лечению до полного освобождения от кампилобактеров из организма животных. Важным мероприятием является ликвидация бесконтрольного использования быков в стадах маточного поголовья.
В неблагополучных пунктах по вибриозу овец вводятся ограничительные мероприятия. Больное поголовье животных подлежит изоляции в отдельные группы. Абортированные плоды, последы собирают в специальную тару, дезинфицируют. Животных подвергают лечению. В неблагополучных пунктах проводят иммунизацию.
При кампилобактериозе среди других видов животных также необходимо выполнять систему ограничительных мероприятий, животных обрабатывать антибиотиками тетрациклинового ряда.
В системе противокампилобактериозных мероприятий особое значение приобретает устранение путей распространения вибрионов. Животные являются основным резервуаром кампилобактеров. Аналогичное положение занимает дикая и домашняя птица. Это обуславливает необходимость обеспечения условий, ограничивающих или полностью исключающих контакт синантропной птицы с животноводческими фермами, выгулами.
На фермах, предприятиях, перерабатывающих сырье жи вотного происхождения, в блоках общественного питания должны в полном объеме выдерживаться требования техноло гии, особенно требования санитарной культуры при переработке сырья животного происхождения. Показано, что трансформация возбудителя происходит различными путями: через молоко, полученное от коров с заболеванием мастит, через мясо, контаминированное возбудителем в период разделки туш животных, в период приготовления мясных, колбасных полуфабрикатов и т.д. Немаловажное значение в комплексе мероприятий отводится осуществлению дератизации, дезинсекции и дезинфекции на животноводческих объектах, на перерабатывающих предприятиях, а также на предприятиях общественного питания. Отходы пищевых предприятий используются в корм животным, в случае контаминации их кампилобактерами они могут стать одним из факторов в распространении и заражении животных.
Кампилобактериоз относится к зооантропонозам. Заболевание людей в связи с этим может быть обусловлено контактом при содержаний и уходе за сельскохозяйственными животными, птицей, в собачьих питомниках, а также при работе в качестве персонала на убойных площадках, мясокомбинатах, молокозаводах. Заражение возможно в домашних условиях в результате контакта с собакой, кошкой, имеющих признаки диареи, а также при содержании декоративных птиц. Большой риск заражения людей существует при употреблении воды из озер, рек, ручьев. Если они подвергаются загрязнению сбросами с животноводческих ферм, комплексов, предприятий перерабатывающих сырье животного происхождения. В этом отношении могут представлять эпизоотологическую и эпидемиологическую опасность площадки, навесы для летне-лагерного содержания животных, обычно размещаемые по берегам водных источников.

ЛИТЕРАТУРА

I. Бюллетень Всесоюзного института экспериментальной ветеринарии. - М. - 1984. - Вып. 56.
2. Голиков А.В. Вибриоз животных и птицы. - М., 1978.- 110 с.
3. Триленко П.А. Вибриоз крупного рогатого скота и овец. - М.: Сельхозиздат, 1961, - 240 с.
4. Чайка Н.А., Хазенсон Л.Б., Бутцлер Ж.П. Кампилобактериоз. - М.: Медицина, 1988. - 350 с.


СОДЕРЖАНИЕ
Краткая история ...................................... 3
Возбудители кампилобактериоза........................ 3
Эпизоотология........................................ 4
Патогенез............................................ 10
Кампилобактериоз отдельных видов ..................... II
Диагностика кампилобактериоза........................ 13
Лечение и иммунитет.................................. 19
Меры борьбы и профилактика ........................... 2С
Литература........................................... 22


Кирьянов Едисей Автомонович

КАМПИЛОБАКТЕРИОЗ ЖИВОТНЫХ


Подписано в печать 14. 04. 1992г.
Формат 60x90 1/16. Бумага писчая. Печать офсетная.
Уч. изд. л. 1,5. Тираж 200 экз.

Приморский сельскохозяйственный институт.
692500. Уссурийск, пр. Блюхера, 44.

Участок оперативной полиграфии Приморского с.-х. ин-та.
692500. Уссурийск, ул. Раздольная, 8.

Эта лекция воспроизводится по оригинальному изданию 1992 года. Ссылка на этот сайт (vetfac.narod.ru), и на автора лекции (Кирьянов Едисей Автомонович) обязательна.

Если вы не нашли здесь того, что искали, вы можете заказать реферат или контрольную работу на этом сайте. Все работы выполняются опытным преподавателем микробиологии и не копируются с сайтов рефератов. Все подробности можно узнать, пройдя по этой ссылке.

Rambler's Top100
Hosted by uCoz